了解一下MDA的測(cè)量方法
一：原理
丙二醛（MDA）是常用的膜脂過(guò)氧化指標(biāo)，在酸性和高溫度條件下，可以與硫代巴比妥酸（TBA）反應(yīng)生成紅棕色的三甲川（3，5，5-三甲基惡唑-2，4-二酮），其最大吸收波長(zhǎng)在532nm。但是測(cè)定植物組織中MDA時(shí)受多種物質(zhì)的干擾，其中最主要的是可溶性糖，糖與TBA顯色反應(yīng)產(chǎn)物的最大吸收波長(zhǎng)在450nm，但532nm處也有吸收。植物遭受干旱、高溫、低溫等逆境脅迫時(shí)可溶性糖增加，因此測(cè)定植物組織中MDA—TBA反應(yīng)物質(zhì)含量時(shí)一定要排除可溶性糖的干擾。低濃度的鐵離子能夠顯著增加TBA與蔗糖或MDA顯色反應(yīng)物在532、450nm處的消光度值，所以在蔗糖、MDA與TBA顯色反應(yīng)中需一定量的鐵離子，通常植物組織中鐵離子的含量為每克千重100—300ug/g，根據(jù)植物樣品量和提取液的體積，加入Fe3+的終濃度為0.5umol/L。
二：試劑
1：質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%三氯乙酸（TCA）；
2：質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.6%硫代巴比妥酸：先加少量的氫氧化鈉（1mol·L-1）溶解，再用10%的三氯乙酸定容；
三：方法
1：MDA的提取 稱(chēng)取剪碎的試材1g，加入2mll0%TCA和少量石英砂，研磨至勻漿，再加8mlTCA研磨，勻漿在4000r/min離心10min，上清液為樣品提取液。
2：顯色反應(yīng)和測(cè)定 吸取離心的上清液2ml（對(duì)照加2ml蒸餾水），加入2ml0.6%TBA溶液，混勻物于沸水浴上反應(yīng)15min，迅速冷卻后再離心。取上清液測(cè)定532、600和450nm波長(zhǎng)下的消光度。
四：結(jié)果
C1=11.71D450
C2={6.45(D532 - D600) - 0.56D450}NW-1
C1——可溶性糖的濃度（mmol/L）
C2——MDA的濃度（·umol/L）
D450、0532、D600分別代表450、532和600nm波長(zhǎng)下的消光度值。
N：提取液總體積（ml）
W：植物組織鮮重
